本发明提供了一种高特异性抗CD20单克隆抗体及其应用，具体地，提供了一种多肽，其特征在于，具有如式I的结构：X0-Cys-Pro-Tyr-Ala-Asn-Pro-Ser-Leu-Cys-X1-COOH，式I；其中，X0为无，或乙酰基（CH3-CO-）等保护基，X1为无，或1-10个氨基酸构成的肽段；且所述多肽具有与抗CD20单克隆抗体结合的活性。本发明多肽可特异性结合于抗CD20单克隆抗体，从而通过ELISA准确地测定样品内极微量的利妥昔单抗(Rituximab)等抗CD20单克隆抗体，方法简单、经济，特异性强，灵敏度高。