本发明公开了一种检测CPT1B基因突变的引物，包括扩增CPT1B基因全部编码外显子及外显子/内含子交界区突变的引物，其引物序列如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.26所示。本发明还公开了一种检测CPT1B基因突变的试剂盒，以及一种非诊断目的检测CPT1B基因突变的方法。本发明克服了现有技术中仅对热点突变进行检测的局限性，通过设计特异的扩增引物即可对CPT1B基因的全部编码外显子及外显子/内含子交界区进行捕获，一次性的将多个潜在的突变位点检测出来。