本发明是一种胶原多肽基表面活性剂的制备方法，将废革屑用氢氧化钠的强碱溶液水解液后过滤去除含铬滤渣，滤液减压蒸馏得到蛋白质水解液。将油酰氯与正己烷按一定比例混合，缓慢滴加到经冰水冷却后的浓缩蛋白质水解液中，反应20~30min后将温度升高到20~30℃老化反应。反应完全后，将温度升高到50~60℃，除去部分正己烷。将反应产物倒出，经过离心分离去除副产物油酸钠和多余的正己烷溶剂，得到胶原多肽基表面活性剂。以含铬皮革废弃物为主要原料，制备出高产率、高效蛋白基表面活性剂，能够作为脱脂剂重新应用于制革工艺，不仅实现了废弃物的资源化利用，而且降低了制革企业化学原料的总成本。