本发明公开了一种从南极磷虾中提取及检测己二酸二辛酯的方法，(1)以南极磷虾为原料，采用乙醇为溶剂，进行超声提取，过滤提取液，得滤液；(2)将滤液蒸干，得到己二酸二辛酯的粗提物；(3)利用柱层析对己二酸二辛酯的粗提物进行精制；(4)进行初步检测得到己二酸二辛酯样品；(5)利用气相色谱-质谱检测己二酸二辛酯含量。本发明的方法操作简单、准确和可靠，为南极磷虾提取及检测己二酸二辛酯提供了完整思路。本发明从南极磷虾中提取及检测己二酸二辛酯，进一步开发了南极磷虾的利用价值，同时也为清洁的可再生能源提供方向。