本发明公开了一种奶味酶解基料的制备方法及其应用，其中制备方法包括以下步骤：无水奶油加入过量的天然混合溶剂，加入来源于微生物的脂肪酶进行催化转酯化反应，离心取上层，加入部分无菌水，利用来源于动物胰腺的脂肪酶进行催化水解，释放脂肪酸，浓缩后即得水溶性奶味酶解基料。得到的奶味酶解基料可以直接作为食品配料添加至食品中，改善食品风味和口感；还可作为原料，经过调配得到奶味香精后应用，且得到的奶味香精具有天然的协调感，没有不良的化学气，与市场上现有的产品相比，具有显著的进步。本制备方法工艺简单，成本低，具有广阔的市场前景。