本发明公开了一种富含维生素D的褐藻‑南瓜醋饮制备方法。本发明的制备过程如下：（1）准备南瓜汁、褐藻破碎液、醋酸菌培养液；（2）南瓜汁中接入活性干酵母进行酒精发酵；（3）过滤去除酒渣；（4）拌入清酒液体积1/9‑1/10的褐藻破碎液；（5）用醋酸菌进行醋酸发酵制备南瓜原醋；（6）调配；（7）过滤除菌；（8）灌装。该保健醋制备过程中使用混合醋酸菌（醋酸菌AS1.41和葡糖醋杆菌Gluconacetobacter hansenii，ATCC 23769）、褐藻原料、以及间歇式搅拌发酵方法，制得的醋中维生素D含量高，500mL醋饮可补充4.5μg左右维生素D，风味清香且独特，是一种良好的骨质保健饮品。