一种用于扩增灰葡萄孢菌四个基因的方法及其多重PCR引物组
摘要:
一种用于扩增灰葡萄孢菌四个基因的方法及其多重PCR引物组涉及分子生物学领域。本发明是在已知灰葡萄孢菌对苯并咪唑类、啶酰菌胺类、异菌脲和环酰菌胺等多种杀菌剂的抗药性突变位点的基础上,建立的一种用于同时扩增β‑tub、BsOS1、erg27、SdhB四种基因片段的PCR引物组。本发明可直接采用提取的灰葡萄孢菌基因组作为模板,用设计的引物组对模板进行扩增,获得富集的四个基因片段。本发明是首次采用多重PCR方法对灰葡萄孢菌的四个抗药性突变基因进行同时扩增,为后期抗药位点的检测大大减少了工作量。本发明经过对PCR反应体系的优化,将四个基因片段在同一PCR反应中进行扩增。
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