一种从沙冬青提取基因组DNA的方法
摘要:
一种从沙冬青提取基因组DNA的方法,包括如下步骤:(1)植物材料液氮速冻研磨成粉;(2)加DNA提取液并加蛋白酶K至20μg/mL,65℃保温;(3)离心收集上清液,加等体积的苯酚:氯仿:异戊醇混合液抽提,再离心收集上清液;(4)加0.6~0.8倍体积异丙醇沉淀DNA;乙醇洗涤,部分干燥后溶于TE缓冲液,得DNA粗提液;(5)向DNA粗提液中加入NaCl至0.5mol/L,再加入CTAB/NaCl溶液,并加入RNase A至终浓度10μg/mL,65℃保温;(6)依次用等体积苯酚:氯仿:异戊醇混合液和等体积氯仿:异戊醇混合液抽提,收集上清液;(7)加0.6~0.8倍体积异丙醇沉淀DNA,再用乙醇洗涤,部分干燥后溶于TE缓冲液,得到高质量的DNA提取液。本发明可以从沙冬青提取高质量的基因组DNA。
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