本发明涉及生物化学检测技术领域，尤其涉及一种试纸条及其制备方法与在尿微量白蛋白和β2微球蛋白联合检测中的应用。本发明提供的试纸条，在底板上依次设置有的样品垫、金标垫、层析膜、吸水纸；其中，金标垫、层析膜上包被有特定含量的抗体或抗原，从而使得良好的控制试纸条的检测限恰为白蛋白和β2微球蛋白的cut off值。并且，本发明提供的试纸条采用的抗体浓度使得白蛋白与β2微球蛋白的检测能够同时进行而不互相干扰。因此，采用本发明的试纸条能够实现对尿液样本的直接检测，节省了前处理的步骤，且其检测更加快速、可靠。实验表明，本发明提供的试纸条准确率较高，且该试纸条的制备方法十分简单。