本发明属于药物分析领域，具体涉及一种建立茜草藤药材的指纹图谱的方法。该方法以茜草藤药材为检测对象，建立了茜草藤药材的指纹图谱的方法，确认了共有特征峰1号峰、2号峰、3号峰、4号峰、5号峰和6号峰芦丁，选择6号峰芦丁作为指纹图谱中的内参考峰，确定了各共有特征峰的相对保留时间，且通过结合该指纹图谱中多个色谱峰的信息，能够全面地、快速地检测茜草藤药材的质量，有利于其全面质量检测和整体质量控制，从而有助于提高该药物使用的安全性和稳定性。同时，本发明建立的茜草藤药材的指纹图谱的方法具有精密度高、重复性好、稳定性高等优点。