本发明公开一种双齿围沙蚕Gα重组蛋白、多克隆抗体及Gα蛋白ELISA检测方法，是通过Gα开放阅读框设计特异性引物并通过PCR获得目的片段，构建了双齿围沙蚕Gα蛋白的原核表达系统，获得了纯化的双齿围沙蚕Gα重组蛋白，制备了其多克隆抗体，并建立了双齿围沙蚕Gα蛋白的ELISA检测方法，可利用方法简单、特异性强的ELISA技术测定双齿围沙蚕在环境雌激素污染下Gα蛋白的变化情况，可为环境雌激素对双齿围沙蚕毒性效应的机制提供实验基础及依据。