一种基于纳米粒子稳定Pickering乳液作为填料的整体柱制备方法，它涉及分析检测和微纳米技术领域，具体涉及一种整体柱的制备方法。本发明的目的是要解决现有整体柱的填料亲疏水性各不相同，不能同时分离富集亲疏水性不同的分子的问题。方法：一、制备纳米粒子稳定Pickering乳液；二、整体柱预处理；三、整体柱内填充Pickering乳液；四、整体柱洗脱；得到基于纳米粒子稳定Pickering乳液作为填料的整体柱。本发明方法具有快速、高效、便捷、成本低、环境友好的优点，同时可大量制备并重复使用。本发明可获得一种基于纳米粒子稳定Pickering乳液作为填料的整体柱制备方法。