本发明公开了一种太平洋牡蛎中性多糖的制备方法，包括以下步骤：（1）将太平洋牡蛎干粉通过丙酮脱脂，干燥后得到脱脂牡蛎粉；（2）将脱脂牡蛎粉溶于水中，用超声微波萃取仪处理，将处理后的溶液离心，上清液蒸发浓缩，得到牡蛎多糖粗提物；（3）将牡蛎多糖粗提物加入乙醇‑(NH4)2SO4双水相体系进行萃取分离，萃取后的下相为牡蛎中性多糖粗提液；（4）将牡蛎中性多糖粗提液进行透析，得到牡蛎多糖精提液，浓缩干燥后即可得到牡蛎中性多糖。本发明提取工艺简单、成本低，适于间歇性和规模化生产加工高纯度、高收率、高生物活性的牡蛎中性多糖成品，且所制得的牡蛎中性多糖可长时间贮存、纯度高，能够提高小鼠脾淋巴细胞免疫活性，抑制Hepg‑2肝癌细胞活性。