本发明公开了一种光响应细胞外基质复合薄膜及其制备方法，该方法如下：在可光致细胞脱附的细胞培养表面如(TiO2纳米点薄膜)上高密度培养细胞，在培养的过程中加入光响应纳米颗粒，如TiO2纳米颗粒、ZnO纳米颗粒等，这些纳米颗粒会被细胞内吞，分散在细胞内及细胞间，当细胞培养成片层后，通过光致细胞脱附，获得一层完整的细胞片层，将其清洗后再进行脱细胞处理进而获得光响应细胞外基质复合薄膜。本发明方法制得的光响应细胞外基质复合薄膜，可应用于生物医用材料等领域。此外本发明的制备方法，工艺简单，易于实现，有利于进行推广应用。