本发明提出了一种利用多倍体花药培养创建二倍体水稻品系的方法，它是充分利用经过减数分裂后细胞内染色体减半的特点，通过花药培养使已通过减数分裂形成的小孢子在其合适的发育阶段，经过诱导培养后形成愈伤组织，并经分化出苗而形成稳定的二倍体水稻品系，与其对应的四倍体水稻品系构建成2x，4x材料体系，它包括：a.选择稳定的四倍体水稻品系作培养基材；b.取材观察花药发育时期为处于小孢子单核靠边期的幼穗；c.低温预处理幼穗；d.花药愈伤组织诱导；e.花药愈伤组织分化出苗；f.芽苗分化出根；g.形态学和细胞学技术确定花药培养形成植株的二倍体真实性。本发明方法简单，成本低，容易操作。