本发明公开了一种畜禽粪便堆肥除臭保氮菌株、菌剂及其制备方法和应用。该菌株为巨大芽孢杆菌DF‑2，是从腐熟的畜禽粪便堆肥中分离得到，制备得到的菌剂接种到猪场废水中，反应15d后对NH3、H2S的去除率分别达89.5％、82.7％，脱臭效果明显，且对废水中的有机物有明显的降解效果，反应15d时COD的去除率达91.2％；通过实际堆肥，与不接菌剂的试验处理比较，用该菌剂生产猪粪堆肥只需18～22天，比传统堆肥缩短腐熟进程2‑3倍，且能明显减少氨气的排放，较空白对照组相比，氨气释放量降低65％左右，氮素积累增加30％以上。因此，通过该菌剂的作用，猪粪堆肥能达到快速腐熟并降低氨气挥发，从而减少恶臭的产生及氮素损失。