一种莪术茎尖玻璃化超低温保存及解冻方法
摘要:
本发明公开了一种莪术茎尖玻璃化超低温保存及解冻方法,主要包括丛生芽诱导培养、继代培养、预培养、装载液处理、玻璃化保护液处理、迅速冷冻以及解冻处理等步骤。本发明建立起莪术种质资源的超低温保存的技术程序,填补了莪术茎尖超低温保存技术的空白;本发明所采用的冰冻保护剂成本低、毒性低,冷冻介质液氮性质稳定、容易制得和价格便宜,且超低温保存操作简单,减少了在各项操作过程中对茎尖的机械损伤,经保存后的茎尖生活力仍然可高达79%,一次保存可以长期稳定存放,简化传统种植和组培育苗需要频繁继代的繁琐操作。本发明提供的解冻方法操作简单,使细胞在解冻过程中未受到机械损伤,莪术茎尖的生活力未受影响。
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