一种磷脂酶A1辅助蛋白PlaS的表达及纯化方法
Abstract:
本发明提供一种磷脂酶A1辅助蛋白PlaS的表达方法,将磷脂酶A1辅助蛋白plaS基因N端去除信号肽,得到截短辅助蛋白,然后构建大肠杆菌/截短辅助蛋白表达菌株,将表达菌株接种至培养基中进行目的蛋白诱导表达。本发明人采用N端截短技术,将plaS基因N端截短35AA,并成功构建了BL21/dSP28表达菌株,使辅助蛋白进行大量表达。且通过对表达培养基组分的优化,获得了能够使目的蛋白大量可溶表达并易纯化的培养基。然后采用不同纯化方式对目的蛋白进行纯化,确定了最佳纯化方法。该培养基使目的蛋白在破碎上清中大量可溶性表达,减少了在蛋白纯化过程中变复性的繁琐操作,纯化方法提高了蛋白得率,使纯化过程更为简便。
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