Invention Publication
- Patent Title: 一种磷脂酶A1辅助蛋白PlaS的表达及纯化方法
- Patent Title (English): Expression and purification method of phospholipase A1 accessory protein PlaS
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Application No.: CN201711137213.9Application Date: 2017-11-16
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Publication No.: CN108004261APublication Date: 2018-05-08
- Inventor: 薛正莲 , 朱昊 , 王洲 , 刘艳 , 陈阿娜 , 杨蒙 , 甘玉飞
- Applicant: 安徽工程大学
- Applicant Address: 安徽省芜湖市北京中路
- Assignee: 安徽工程大学
- Current Assignee: 安徽工程大学
- Current Assignee Address: 安徽省芜湖市北京中路
- Agency: 北京东方灵盾知识产权代理有限公司
- Agent 苏向银
- Main IPC: C12N15/70
- IPC: C12N15/70 ; C07K14/00 ; C07K1/14

Abstract:
本发明提供一种磷脂酶A1辅助蛋白PlaS的表达方法,将磷脂酶A1辅助蛋白plaS基因N端去除信号肽,得到截短辅助蛋白,然后构建大肠杆菌/截短辅助蛋白表达菌株,将表达菌株接种至培养基中进行目的蛋白诱导表达。本发明人采用N端截短技术,将plaS基因N端截短35AA,并成功构建了BL21/dSP28表达菌株,使辅助蛋白进行大量表达。且通过对表达培养基组分的优化,获得了能够使目的蛋白大量可溶表达并易纯化的培养基。然后采用不同纯化方式对目的蛋白进行纯化,确定了最佳纯化方法。该培养基使目的蛋白在破碎上清中大量可溶性表达,减少了在蛋白纯化过程中变复性的繁琐操作,纯化方法提高了蛋白得率,使纯化过程更为简便。
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