本发明属于基因检测技术领域，公开了一种检测猪PRKAG1基因表达量的方法，包括合成PRKAG1基因特异性引物对A-F和A-R以及内参基因引物对G-F和G-R；提取待测猪的骨骼肌细胞总RNA并反转录成cDNA，得到待测猪的细胞cDNA；以待测猪的细胞cDNA为模板，以S1所述的引物对G-F和G-R为引物qPCR扩增猪GAPDH内参基因，以S1所述的引物对A-F和A-R为引物qPCR扩增猪PRKAG1基因；检测S3中qPCR的结果，计算表达量。本发明通过设计PRKAG1基因特异性引物对，参考内参引物GAPDH的qPCR扩增，以及对qPCR结果的相对定量分析，准确、快速地分析了该基因在实验组和对照组中的表达情况。本发明还提供了一种上述方法的应用。