本发明公开了一种电化学生物传感器用修饰电极及其制备方法、电化学生物传感器及其制备方法和应用，电化学生物传感器用修饰电极包括基础电极及其表面修饰的葫芦脲[7]分子；制备方法包括：将基础电极浸入葫芦脲[7]的水溶液中，使基础电极的表面吸附葫芦脲[7]分子。电化学生物传感器包括上述的电化学生物传感器用修饰电极，其上依次吸附有电子媒介体和生物酶；制备方法包括：将电化学生物传感器用修饰电极依次浸入含电子媒介体的溶液和生物酶溶液中。该电化学生物传感器用修饰电极对电子媒介体具有很好的识别作用，能够与电子媒介体有效结合从而促进酶与电极之间的电子传递；该电化学生物传感器检测灵敏度高，能直接在疾病诊断中进行应用。