发明公开
- 专利标题: 一种基于PCR-DGGE技术的沙门氏菌分型方法
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申请号: CN201810767361.7申请日: 2018-07-13
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公开(公告)号: CN108866170A公开(公告)日: 2018-11-23
- 发明人: 杨向莹 , 张捷 , 谢雪钦 , 张琦慧 , 石嵩 , 畅晓晖 , 陈广全
- 申请人: 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心
- 申请人地址: 北京市朝阳区甜水园街6号
- 专利权人: 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心
- 当前专利权人: 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心
- 当前专利权人地址: 北京市朝阳区甜水园街6号
- 代理机构: 天津盛理知识产权代理有限公司
- 代理商 赵瑶瑶
- 主分类号: C12Q1/686
- IPC分类号: C12Q1/686 ; C12Q1/10
摘要:
本发明涉及一种基于PCR‑DGGE技术的沙门氏菌分型方法,⑴提取供试样品的DNA,并进行样品编号;⑵以样品基因组DNA为模板,采用引物GC‑rpoB1/rpoB3R扩增样品;⑶PCR产物的变性梯度凝胶电泳分析;⑷DGGE图谱中优势条带的回收与测序;⑸DGGE凝胶条带回收后,筛选阳性克隆测序;⑹采用MEGA5软件,Neighbor‑joining法构建系统发育树。PCR‑DGGE技术具有分离快速简便、重复性好等优点,避免了分离纯化和培养所造成的分析上的误差,通过指纹图谱直接再现菌群结构,并且通过序列分析切下的带或者通过独特的探针杂交鉴定其种类,是一种快速高效的病原微生物分型检测方法。