本发明公开了十三种转基因大豆检测用多重PCR试剂盒及检测方法，可快速检测我国农业部批准进口的13种转基因大豆，包括MON87701、GTS40‑3‑2、MON89788、CV127、A2704、A5547、DP356043、DP305423、MON87769、MON87708、305423×40‑3‑2、MON87701×MON89788、MON87705；本发明公开的多重PCR试剂盒基于“公共引物”介导的多重PCR方法，包括公共引物、多重引物、多重PCR体系检测；新设计的退火温度法提高多重PCR体系的特异性、敏感性，该多重PCR方法具有包容性，可继续增加检测靶标，有利于提高多重PCR的检测通量。本发明具有灵敏度高，经济、快速、操作简单等优点，可应用于食品检测。