本发明涉及一种热带假丝酵母培养物及其制备方法和应用，属于微生物应用技术领域。本发明提供了一种热带假丝酵母培养物的制备方法，包括以下步骤：1)将所述热带假丝酵母接种于种子培养基中进行种子培养，得到种子液；2)将步骤1)得到的种子液接种于液体发酵培养基中进行第一发酵培养，得到发酵液；3)当步骤2)所述发酵液中酵母菌数达到5×108～1×109个/mL时，连续加入几丁质溶液进行诱导培养，得到诱导培养液；4)将步骤3)所述诱导培养液进行第二发酵培养，得到培养物。本发明制备方法得到的热带假丝酵母培养物能抑制炭疽菌，对炭疽菌的抑制作用不低于75％。