本发明公开了一种纤维素增强型葡聚糖基可注射抗菌水凝胶敷料及其制备方法。所述水凝胶由氨基化葡聚糖和醛基化葡聚糖在人体体温下交联获得，其内部分布有改性纤维素短纤及多肽。制备方法为：将葡聚糖与酸酐反应，然后经过脱BOC后得到含有多氨基的葡聚糖；将葡聚糖经氧化剂选择性氧化成醛基化葡聚糖；将含有多氨基的葡聚糖、醛基化葡聚糖分别制成水溶液，混合后，加入改性纤维素短纤及固相合成的多肽，在人体体温条件下，制备纤维素增强型葡聚糖基可注射抗菌水凝胶敷料。本发明不仅具有良好的机械性能，同时具备优良的生物相容性及抗菌性能，具有优良的抗压及弹性性能，能促进伤口快速愈合，适用于不同深度慢性皮肤溃疡的伤口治疗与修复。