本发明公开了阪崎克罗诺杆菌干粉化双重PCR检测试剂盒，该试剂盒由干粉化检测试剂、复溶液、阳性对照干粉、阴性对照干粉、6×Loading buffer和裂解液组成。本发明通过比对筛选获取阪崎克罗诺杆菌特异性靶基因16S rDNA和ompA的高度保守区序列，并根据该2段序列分别设计1对PCR扩增引物，同时优化测试得到有效的双重PCR反应体系，经核酸电泳观察结果，较传统检测方法更加简便，具有检测时间短以及特异性好等优点，适用于婴幼儿配方食品、乳和乳制品及其原料中阪崎克罗诺杆菌的检测。本发明采用干粉化的检测试剂，具有较好的稳定性，使用时即溶即用，操作简便，避免试剂损耗、污染等，并有利于产品储存以及长途运输，为偏远地区的基层检测工作提供便利。