本发明涉及免疫检测技术领域，公开了一种黄曲霉毒素B1降解酶及其应用和检测黄曲霉毒素B1的免疫层析试纸条。本发明所述黄曲霉毒素B1降解酶具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。本发明利用所述黄曲霉毒素B1降解酶特异性结合黄曲霉毒素B1的特性制作胶体金免疫层析试纸条，与黄曲霉毒素B1具有更高的亲和力，灵敏度高；具有更强的特异性，与其他毒素无交叉；且受体可以体外原核表达，与抗体相比较具有产量高，周期短，成本低的优势，且整个过程可控；免疫层析试纸条检测黄曲霉毒素B1时无需任何其他试剂，加入处理后的样品液后，5-10min即可获得结果，大大提高效率，可实现黄曲霉毒素B1的现场快速检测。