本发明属于胶原蛋白技术领域，尤其涉及一种非变性胶原蛋白提取方法和胶原蛋白的鉴定方法。本发明提供了一种非变性胶原蛋白提取方法，包括以下步骤：a)将胶原蛋白加入孵育液进行孵育，离心，得到不溶物；b)将所述不溶物依次进行酶解、中和、盐析，得到非变性胶原蛋白；其中，所述孵育液选自Tris‑HCl溶液、Bis‑Tris溶液、咪唑缓冲液或胰蛋白酶培养液。实验结果表明，本发明采用孵育液对胶原蛋白进行孵育，可除去变性胶原蛋白，对非变性胶原蛋白进行提取，可提高胶原蛋白产品的活性。