本发明公开了一种人卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法和培养方法，涉及医学技术领域，其配方以质量份数计包含以下组分：其配方以质量份数计包含以下组分：75IU/L rFSH 70‑95份，150IU/L rHCG 60‑70份，20%SPS 50‑55份，2mg/L EGF 30‑40份，25mmol/L丙酮酸钠 20‑25份和基本细胞培养液Qiunn’s 1029 150‑200份。该人卵母细胞体外成熟培养液及其制备方法和培养方法，可以有效降低购买商品化体外成熟培养基的成本，该培养基以人囊胚培养液Qiunn’s 1029为基础培养基，该培养基安全无毒副作用，能够促使未成熟卵母细胞特别是三级卵丘‑卵母细胞复合体中的卵母细胞减数分裂，提高该类细胞的体外发育能力，促进细胞质成熟，提高细胞成熟后的卵裂率和囊胚发育率，进一步提高胚胎质量。