本发明属于农业生物技术领域，具体涉及西花蓟马品系的一步双重特异性SS‑COI引物组合及其应用。本发明的西花蓟马品系的一步双重特异性SS‑COI引物组合，包括温室品系和羽扇豆品系通用上游引物TFZ6、温室品系特异下游引物GRZ32和羽扇豆品系特异下游引物LRZ12。本发明的一步双重特异性PCR引物组合扩增产物大小分别为362bp和541bp，对单粒卵及初孵幼虫亦有良好的检测效果，提高了西花蓟马温室品系和羽扇豆品系检测的准确性，节约了检测时间，适宜以试剂盒的形式在进境植物检疫、国内植物检疫和田间防治中推广。