发明公开
- 专利标题: 一种在大肠杆菌中进行木聚糖酶分泌表达的新方法
- 专利标题(英): New method for xylanase secretory expression in escherichia coli
-
申请号: CN201910257530.7申请日: 2019-04-01
-
公开(公告)号: CN109825488A公开(公告)日: 2019-05-31
- 发明人: 易犁 , 张发英 , 何华华 , 喻婵
- 申请人: 湖北大学
- 申请人地址: 湖北省武汉市武昌区友谊大道368号
- 专利权人: 湖北大学
- 当前专利权人: 湖北大学
- 当前专利权人地址: 湖北省武汉市武昌区友谊大道368号
- 代理机构: 北京金智普华知识产权代理有限公司
- 代理商 杨采良
- 主分类号: C12N9/24
- IPC分类号: C12N9/24 ; C12N15/56 ; C12N15/70 ; C12N15/66
摘要:
本发明属于基因工程技术领域,公开了一种在大肠杆菌中进行木聚糖酶分泌表达的新方法,将信号肽融合于木聚糖酶基因的N末端,同时木聚糖酶基因序列的C端添加编码组氨酸标签的密码子,PCR产物回收得到目的基因核苷酸序列Signal peptide-Xylnase-6×His,将目的基因克隆表达载体pET28a中,测序确认得到正确的重组表达载体;将重组表达载体转化至大肠杆菌菌株;向样品中添加IPTG,样品诱导培养;实现木聚糖酶的高效分泌表达。本发明能够将木聚糖酶直接分泌到培养基中;相比于原来的大肠杆菌胞内和或者酵母分泌表达,既能保证高的木聚糖酶活性,同时更容易操作,更省时,且成本更低。