本发明公开了一种链霉菌发酵产物天赐霉素‑A及其衍生物的分离纯化工艺，所述链霉菌为Streptomyces sp.CB03234‑S，已于2017年9月25日保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 2017538；分离纯化工艺包括以下步骤：1)CB03234‑S发酵过程中树脂的添加及其洗脱条件的优化；2)通过聚酰胺填料初步分离纯化含有TNM‑A的发酵粗提物；3)通过反相C18填料进行TNM‑A的中压制备纯化。本发明通过在发酵过程中添加适量的树脂，不仅提高了TNM‑A的产量，更有效地简化了其后续的分离纯化步骤，从中节省了萃取所需的大量有机溶剂，随后通过不同填料的两步纯化，可以获得纯度超过90％的TNM‑A，回收率接近40％，上述分离纯化工艺的建立极大地降低了TNM‑A的分离纯化成本。