分离免疫细胞的方法及其应用
摘要:
本发明公开了一种分离免疫细胞并进一步诱导分化成EPCs的方法,其包括:(1)获取外周血,吸取单个核细胞层液加于离心管中,数次离心,末次离心后吸尽上清,根据计数结果,用RPMI1640培养液配成所需浓度,约为2×107/ml。(2)培养除未贴壁细胞。(3)使用含10%胎牛血清的RPMI1640培养液,添加M‑CSF、IL‑3、诸葛菜素D,各培养孔最终体积为1ml,M‑CSF、IL‑3、诸葛菜素D的终浓度分别为5ng/ml、0.4ng/ml、0.1‑0.3ng/ml,每2天添加试剂1次,对贴壁细胞进行初步培养8天。
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