本发明提供了一种变压器绝缘油中痕量醛类、酮类物质含量的测定方法，包括：配制含有待检醛类和/或酮类物质的甲醇溶液作为标准加入液；在待测的变压器绝缘油中加入标准加入液，配制一系列样品；采用顶空进样法，使用气相色谱‑FID或者气相色谱‑质谱联用法分离检测，获取所述样品中对应的待检物质的色谱图峰面积；根据色谱图峰面积与所述样品中加入的浓度，建立标准曲线，拟合得到线性方程，依据线性方程算出待测绝缘油中的待检物质的含量。本发明的测定方法单次进样可以实现多种醛或酮类物质的测试；实现了绝缘油中醛类、酮类物质的定量、定性测量，且重复性、稳定性好，为变压器中纤维素绝缘材料的老化评估提高了新的判断标准和思路。