本发明公开了一种培养同步脱氮除硫混合菌群的方法，包括：在反应器中接种厌氧氨氧化颗粒污泥，以含氨氮、亚硝氮、硫化物、无机盐、微量元素和碳酸氢钠的模拟废水作为进水，在温度为30～36℃、控制水力停留时间恒定的厌氧条件下运行至稳定；然后采用依次梯度提高进水中硫化物浓度、梯度降低氨氮和亚硝氮浓度、再梯度提高硫化物浓度、最后缩短水力停留时间的方法完成同步脱氮除硫混合菌群的培养。本发明以厌氧氨氧化污泥为单一接种物，通过逐级驯化的方法培养出了同步脱氮除硫的混合菌群，有利于对化工厂等同时含氨氮、亚硝氮和硫化物的废水处理。