本发明属于中药注射液质量控制方法技术领域，具体涉及复方苦参注射液1H-NMR指纹图谱的构建方法及应用。复方苦参注射液1H-NMR指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：(1)获取复方苦参注射液1H-NMR初级代谢物指纹图谱A；(2)获取复方苦参注射液1H-NMR次级代谢物指纹图谱B；(3)对复方苦参注射液1H-NMR初级代谢产物指纹图谱A和次级代谢产物指纹图谱B进行指认和鉴定，确定指纹图谱A和B的特征峰；复方苦参注射液1H-NMR指纹图谱的应用，用于复方苦参注射液的质量检测。本发明建立的复方苦参注射液的1H-NMR指纹图谱，能同时表征复方苦参注射液中21种初级代谢物和次级代谢物，弥补了HPLC指纹图谱对部分成分无法检测的缺陷。