本发明涉及一种好养反硝化细菌筛选引物及方法，属于微生物领域，所述方法包括菌株富集培养、利用本发明所述的nirS、nirK和nosZ基因引物进行LAMP初次筛选，选取LAMP反应中nirS或nirK基因为阳性、同时nosZ基因也为阳性的菌株作为初筛菌株，进行后续筛选；然后利用nirS、nirK和nosZ基因的另外3对引物分别进行PCR二次筛选，选择nirS或nirK基因为阳性、同时nosZ基因也为阳性的菌株为阳性的菌株，进行下一步筛选；再通过产气实验进行第三次筛选，最后获得的菌株即为好养反硝化细菌。本发明引物和方法能够方便、快速、精准地筛选产N2的好养反硝化细菌。