本发明涉及一种利用非渗透抗冻剂和开放式载具冷冻保存石斑鱼胚胎方法，属于低温生物学中鱼类胚胎超低温保存技术领域，所述方法以1mol/L非渗透性糖溶液为抗冻剂，获得发育至肌节期、尾芽期或胚体转动期胚胎进行冷冻保存；开放式载具为两端开口塑料管，一端用筛绢网封口；将胚胎放入冷冻剂中处理4‑10分钟；之后将处理胚胎倒入开放式载具中，底部开口朝上垂直浸入液氮中冷冻保存；所述方法冷冻保存胚胎数量大，且不会对鱼类胚胎细胞造成“溶液损伤”，冷冻胚胎成活率和孵化率高，利用本发明方法冷冻保存云纹石斑鱼胚胎成活率可达到31.30％，孵化率可达到41.28％。