本发明提供一种镰刀菌孢子的保存方法，涉及植物保护技术领域，包括如下步骤：以镰刀菌菌株为原材料进行镰刀菌孢子的培养，得到镰刀菌菌液；对镰刀菌菌液进行过滤，对滤液进行离心后，去除上清液，得到镰刀菌孢子；将镰刀菌孢子的浓度调至工作浓度，得到工作菌液；取工作体积的工作菌液装至第二离心管内，离心，去除上清液，得到孢子沉淀物；将第二离心管风干，得到干燥的孢子沉淀物；将第二离心管密封，于‑20℃条件下保存。本发明提供的镰刀菌孢子的保存方法，保存的镰刀菌孢子，一方面可以作到随用随取，另一方面使用过程中不需要重新计算加入的双蒸水的体积，且制备的工作菌液中镰刀菌孢子的浓度可控，快捷方便，省时省力。