本发明公开了一种双面生理数值测试片的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：通过胶黏剂将薄膜的第一表面粘贴于基材上；在薄膜的第二表面涂布光阻材料后形成第一光阻层，用图罩对第一光阻层进行屏蔽，进行照射后形成图样层；在图样层镀上一层金属层；移除未经照射去除的第一光阻层，位于第一表面上的金属层形成测试线路；在测试线路上涂布一层绝缘材料形成绝缘层，在绝缘层上涂布光阻材料后形成第二光阻层；通过图罩去除位于测试线路上方的第二光阻层，再移除测试线路上方的绝缘层和未经照射去除的第二光阻层，测试线路间形成绝缘层；将第二表面粘贴于基板上，重复上述步骤，得到测试片。该方法可以有效简化制备流程。