本发明公开了一种基于甲醛媒介作用选择性检测L‑色氨酸(L‑Trp)的方法，所述方法包括制备硫化铜纳米片‑壳聚糖/酸化碳纳米管(CuS NS‑CS/F‑MWCNTs)复合材料、制备CuS NS‑CS/F‑MWCNTs/GCE复合膜修饰电极和L‑色氨酸检测等步骤。由于L‑色氨酸和L‑酪氨酸(L‑Tyr)的氧化峰重叠而难以分离，本发明建立了一种通过甲醛(HCHO)与L‑Trp的Pictet–Spengler反应，L‑Trp氧化峰电位转移到0.82V，而L‑Tyr氧化峰电位为0.63V，从而有效地避开L‑Tyr的干扰，实现对L‑Trp进行高选择性检测的方法。将硫化铜纳米片‑壳聚糖/酸化碳纳米管修饰玻碳电极(CuS NS‑CS/F‑MWCNTs/GCE)运用于甲醛媒介中检测L‑色氨酸，50倍浓度的其它氨基酸包括L‑酪氨酸等均不干扰，且稳定性好，检测下限达到4.6×10‑8mol/L，在生命科学领域具有重要的应用价值。