本发明公开了一种废纸屑反硝化碳源填料块的制备方法，包括以下步骤：纤维素产酸菌群培养基的制备及灭菌；将所述纤维素产酸菌群培养基放入厌氧罐内，加入湿腐木和腐叶粉末混合均匀，调整pH为6.5-7.0，在35℃，转速为120转/分钟搅拌，连续培养3天制成菌群悬浊液；在所述菌群悬浊液内加入500g废纸屑，以20转/分钟搅拌7天，之后静置3小时，去除上清液，滤去多余水分得到固体物料，将所述固体物料置于矩形模具中制成废纸屑反硝化碳源填料块，该废纸屑反硝化碳源填料块具有成本低廉、反硝化性能优良等优点。