本发明公开了一种生物基再生剂制备方法，采用高压皂化法合成不饱和植物油酸：将氢氧化钠溶液与天然植物油41～44份依次加入不锈钢高压反应釜混合采用高压皂化法合成不饱和植物油酸，然后把不饱和植物油酸、天然腰果壳油43～48份、脱水剂10～12份和抗氧剂加入玻璃反应釜制备制备生物基再生剂。本发明还提供了一种生物基再生剂及其应用。使用本发明的制备方法制备的生物基再生剂，使得在沥青路面再生工程中旧料合理的再生掺配率达到50％，旧料的利用率显著提高，同时使用本发明的生物基再生剂制备的沥青仍然具有好的针入度、延度，路用性能得到提高。