本发明公开了一种免洗消毒剂、制备方法及其应用，所述免洗消毒剂包含低分子醇类、保湿剂、稳定剂、透明质酸盐、杀菌剂和成膜强化剂，以在消毒剂中所占的重量百分比计，所述低分子醇类为5-60％，所述保湿剂为1-10％，所述稳定剂为0.01-2％，所述透明质酸盐为0.01-2％，所述杀菌剂为0.02-1.0％，以及所述成膜强化剂为0.01-2％，余量为水。本发明提供的免洗消毒剂，由于透明质酸盐与成膜强化剂按比例混合，在手部形成相对强韧的膜，能提高手部的防护，并可延长抑菌时间。此外，所提供的免洗消毒剂可改善皮肤的屏障功能，具有治疗湿疹的作用。