本发明公开了一种无刺花椒组培苗的继代繁育方法，属于经济作物无性繁殖技术领域。具体包括以下步骤：初代培养、切割和继代增殖培养，继代增殖培养直至培养基中PPM用量降为0时结束，且继代增殖培养代数不少于4代。本发明的无刺花椒组培苗的继代繁育方法，通过对培养条件的优化，根据继代培养的次数适当调整培养基成分组成，以及特殊切割工艺等因素的综合研究，建立了无刺花椒组培种苗继代培养的技术体系，使得无刺花椒初代培养的茎段快速稳定的实现继代增殖，从而在短时间内实现大规模的繁育，在无刺花椒繁育生产中具有极大的实用价值。