本发明公开了一种双层人工皮肤培养装置及其使用方法，包括培养盒、密封盖，所述培养盒的内部设有伸缩杆和培养托架，所述伸缩杆的一端安装在培养盒的底板上、另一端安装在培养托架上；一种双层人工皮肤培养装置的使用方法，包括如下步骤：压缩伸缩杆使得培养托架与培养盒的底板相贴合，在培养托架上放一层尼龙膜，在尼龙膜上加一层无细胞胶原凝胶后，接种真皮成纤维细胞，加入培养液，盖上密封盖进行培养，使其形成真皮层；打开密封盖，在真皮层上接种表皮细胞，盖上密封盖培养表皮细胞，使其形成表皮层；将固定柱从培养盒底部固定孔插入，将培养托架顶起，使得表皮层的顶部能够与空气接触，对表皮细胞进行角质化，最终得到双层人工皮肤。