组成型表达猪胃蛋白酶原A的毕赤酵母工程菌及其应用
摘要:
本发明公开了一种组成型表达猪胃蛋白酶原A(PGA)的毕赤酵母工程菌株。本发明将经人工改造的PGA基因连接至毕赤酵母组成型表达载体pGAPZαA,并导入毕赤酵母GS115菌株中,经筛选鉴定得到不需诱导即可高效组成型分泌表达PGA的毕赤酵母菌株GS115-pGAPZαA-PGA。该菌株在培养基YPD中分泌表达猪胃蛋白酶原A,培养48h后酶活为200U·mL-1,实现了猪胃蛋白酶原A在毕赤酵母中的组成型高表达,后期再经过培养基及培养条件优化可实现猪胃蛋白酶原A的高效连续生产。本发明的猪胃蛋白酶原A可在酸性条件下(pH5.0)自动活化生成有活性的胃蛋白酶,可广泛应用于饲料、食品和医药等行业,具有良好的商业应用前景。
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