本发明一种分离筛查三明尤溪烟叶中清甜香特成分的方法，具体包括以下步骤：(1)用水、有机溶剂或二者的混合溶剂对所述烟叶进行提取，得到烟叶提取液，浓缩所述烟叶提取液得到烟叶浸膏；(2)用凝胶渗透色谱法对步骤(1)所述烟叶浸膏进行分离，得到多个流分；(3)对步骤(2)中得到的流分进行香气评价，合并其中清甜香香韵特征突出的流分并浓缩，得清甜香浓缩物；(4)以氘代萘和氘代蒽作为内标，采用GC×GC-TOF MS对步骤(3)所得清甜香浓缩物进行分析，得到所述清甜香浓缩物中的化学成分及浓度；(5)以OAV(香气活性值，Odor activity value)作为评价标准，从步骤(4)所分析得出的化学成分中选择得到所述清甜香成分。所述方法可快速、简单、全面地对烟叶中清甜香成分进行筛查。