本发明公开一种用于Bt Cry2A毒素检测的抗体制备方法及其应用，该抗体是通过免疫Balb/c小鼠后，获得保藏号为CCTCC NO：C2019188杂交瘤细胞分泌产生；本申请同时提供了基于此抗体建立DAS‑ELISA检测方法，该方法最低检测限为10.76ng/ml，对基于50μg/ml的Cry1Aa、Cry1Ab、Cry1Ac、Cry1C、Cry1F毒素的交叉反应率小于0.1％，与Cry1B毒素的交叉反应率为3.2％，特异性较强，可用于Cry2A毒素的快速检测，弥补了Cry2A毒素检测领域的空白。