本发明公开一种大肠杆菌动态生长监测方法。本发明提供一种将大肠杆菌菌落图像与前时刻图像实现配准的方法，使两幅图像角度一致，得到各菌落的质心位置，进而快速得到培养皿中的菌落数目；可定位到每个菌落，统计各菌落在该生长时刻的大小，颜色信息，根据培养时间计算出生长速度，判断菌落在各个时间节点处于哪一生长阶段，进而得到生长曲线；提供一种使用回归模型根据菌落延迟期时间，对数期内的生长速率两个变量值预测菌液浓度，与传统计数法得到的浓度做对比，筛选出实验过程中的错误样本；基于菌落生长的特征，建立回归模型可较精确的预测大肠杆菌菌液浓度，相比于易受外界环境干扰的传统计数法，本方法更精确，得到的数据可靠性更高。