发明人提供了一种石墨烯混合填料及层析柱，所述混合填料中，包括石墨烯材料和层析介质填料，所述石墨烯材料和所述层析介质填料的重量比为1‑50:100，所述石墨烯材料的粒度为500‑5000目，所述层析介质填料的粒度为200‑500目。利用石墨烯的特殊性质(π‑π电子共轭效应)达到具有对π共轭电子结构的化合物的柱吸附，同时，在下层柱具有分离常规杂质的效果，可以进一步分离纯化，吸附杂质，避免了多次操作，可以有效减低目标产物的层析成本和操作时间。